目录号
DNE39
包装规格
100 preps
试剂盒组成
| Component | DNE39 (100 preps) |
|
| DNA提取组分 | Buffer ATS |
60 ml |
|
Buffer WB |
13 ml |
|
|
（使用前按瓶上标签加入无水乙醇） |
||
|
Buffer EB |
15 ml |
|
|
Spin Columns EC with Collection Tubes |
100 |
|
| PCR扩增组分 |
2×UrTaqTM Master Mix (Dye Plus) |
1 ml x 10 |
保存方法
DNA提取组分室温（15-30℃）保存。
PCR扩增组分-20℃保存。
产品介绍
本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的从多种植物样本中快速纯化DNA的方法。独特的缓冲体系使裂解液中的核酸高效特异地结合在硅胶质离心吸附柱上，获得的核酸质量稳定，不含蛋白、核酸酶和其他PCR抑制物，可以直接用于PCR、荧光定量PCR等基因扩增实验。
适用样本
植物/多糖多酚植物；新鲜采样的植物叶片4-8℃保存7天不影响提取，避免冻融。
操作步骤
1.取50 mg左右植物组织，用组织研磨仪破碎，加入600 μl Buffer ATS，涡旋振荡混匀，室温放置1分钟。
2. 12,000 rpm（~13,400 ×g）离心2分钟。
3. 吸取上清液至吸附柱（Spin Columns EC）中，12,000 rpm离心30 s，弃废液。
4. 加入600 μl漂洗液WB，12,000 rpm离心2分钟，弃废液和收集管。
5.将吸附柱EC放入新的1.5 ml离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100 μl Buffer EB，室温放置1分钟，12,000 rpm 离心30 s，收集DNA溶液进行下一步PCR体系配制。
附录
本试剂盒提取的DNA直接作为PCR模板使用，无需测定浓度。按下列步骤进行PCR扩增实验：
1、 反应体系配制（20 μl体系为例）| ddH2O | 6 μl | |
| 2×UrTaqTM Master Mix (Dye Plus) | 10 μl | |
| Primer F(10 μM) | 1 μl | |
| Primer R(10 μM) | 1 μl | |
| 模板DNA | 2 μl |
2、 PCR反应循环的设置
| 预变性 | 95℃* | 3 min | |
||
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 30-35 cycles |
||
| 退火 | 55-65℃** | 15 sec | |||
| 延伸 | 72℃ | 60 sec/kb | |||
| 彻底延伸 | 72℃ | 2 min(彻底延伸) | |||
| 保存 | 4℃ | ∞ | |||
*如果模板具有复杂二级结构或高GC区域，可将预变性时间延长至5~10 min，以提高预变性效果；
**退火温度需要根据引物退火温度调整，一般设置成低于引物退火温度3-5℃即可。对于复杂模板，需要调节退火温度和延长延伸时间来实现高效扩增。
